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HIV实验室的样品采集和处理方法

文章出处:oppb.cn 人气:发表时间:2020-02-13 08:10

HIV实验(experiment)室的样品采集和处理方法:
艾滋病检测最常用的样品是血液,包括血清、血浆和全血。唾液或尿液有时也可作为测试(TestMeasure)样品。常用的血液样品的采集和处理方法如下:
血清样品采集和处理
1 用一次性注射器(或真空采血管)抽取一定量静脉血,室温下自然放置1~2小时,待血液凝固(solidification)、血块收缩后再用3、000r/min离心15min,吸出血请备用。净化实验室控制系统是整个洁净实验室安全运行的神经中枢,由于洁净实验室-生物安全实验室的实验对象是危险性的微生物,出于严格控制污染的原则,它要求以最少的维护人员,运用最优化的管理维护手段,来实时监控每一个实验室中设备所处的物理环境,保证实验室运行过程中始终处于相对负压环境,防止危险性微生物外泄。
2如用滤纸(Filter Paper)片采样,则手指或耳垂局部(part)严格按常规进行消毒,在刺破皮肤,迅速把滤纸(Filter Paper)片沾上,切勿让血液滴落在其它物体表面造成污染。采血后要待血样干燥后再包装送检。
抗凝血样品采集和处理
1用加有抗凝剂的真空采血管(或一次性注射器抽去静脉血,转移至加有抗凝剂的试管),反复轻摇,分离血浆和血细胞(blood cell)备用。实验室净化空气调节系统必须可靠运行,采用先进技术,合理利用和节约能源与资源,保证环境的质量和安全,为实验人员提供所需要的温度和湿度,保障生物实验在安全的条件下进行,以确保实验结果得准确性。洁净实验室主要用于微生物学、生物医学、生物化学、动物实验、基因重组以及生物制品等研究使用的实验室统称洁净实验室-生物安全实验室。无菌试验室、生物安全实验室由主实功能验室与其他实验室及辅助功能用房组成。
2应根据实验(experiment)要求选用适当的抗凝剂,如CD4+/CD8+T淋巴细胞测定可选用K3EDTA或肝素或柠檬酸钠(Sodium),HIV病毒分离、核酸定性/定量检测可选用K3EDTA或枸橼酸钠(Sodium)。
3用于核酸定性检测时,采集的抗凝全血应在4~8h内分离PBMC和血浆,否则应在24~48h内分离血浆和血细胞(blood cell)。(病毒载量测定不同方法对样品的要求见第四章4.1中表2;CD4+/CD8+T淋巴细胞测定样品采集要求见第五章4.1。) 2.1.3 采集样品注意事项
3.1采集样品原则上应按临床采血技术标准操作(试剂盒有特殊要求)。
3.2采集样品时应注意安全,建议采用真空采血管及蝶形针具,以避免直接接触血液;直接接触HIV感染者/艾滋病(AIDS)病人血液/体液的操作,应带双层手套。